enketobg

Larvicida kaj kontraŭtermita agado de mikrobaj biosurfaktaĵoj produktitaj de Enterobacter cloacae SJ2 izolita de la spongo Clathria sp.

La ĝeneraligita uzo de sintezaj insekticidoj kaŭzis multajn problemojn, inkluzive de la apero de rezistemaj organismoj, media degenero kaj damaĝo al homa sano.Tial, novaj mikrobaj insekticidoj, kiuj estas sekuraj por homa sano kaj la medio, estas urĝe bezonataj.En ĉi tiu studo, rhamnolipid biosurfaktant produktita fare de Enterobacter cloacae SJ2 estis uzita por taksi toksecon al moskito (Culex quinquefasciatus) kaj termito (Odontotermes obesus) larvoj.La rezultoj montris, ke estis dozo-dependa mortoprocento inter traktadoj.La LC50 (50% mortiga koncentriĝo) valoro je 48 horoj por termitoj kaj moskitaj larvaj biosurfaktantoj estis determinita uzante nelinian regresan kurban alĝustigmetodon.La rezultoj montris, ke la 48-horaj LC50-valoroj (95% konfidenca intervalo) de larvicida kaj kontraŭtermita agado de la biosurfaktanto estis 26,49 mg/L (intervalo 25,40 ĝis 27,57) kaj 33,43 mg/L (intervalo 31,09 ĝis 35,68) respektive.Laŭ histopatologia ekzameno, traktado kun biosurfaktantoj kaŭzis severan damaĝon al organelaj histoj de larvoj kaj termitoj.La rezultoj de ĉi tiu studo indikas, ke la mikroba biosurfactant produktita de Enterobacter cloacae SJ2 estas bonega kaj eble efika ilo por Cx-kontrolo.quinquefasciatus kaj O. obesus.
Tropikaj landoj spertas grandan nombron da moskitaj malsanoj1.La graveco de moskito-portitaj malsanoj estas ĝeneraligita.Pli ol 400 000 homoj mortas pro malario ĉiujare, kaj kelkaj gravaj urboj spertas epidemiojn de gravaj malsanoj kiel dengo, flava febro, ĉikungunjo kaj Zika.2 Vektortransportitaj malsanoj estas rilataj al unu el ses infektoj tutmonde, kie moskitoj kaŭzas la plej multajn. signifaj kazoj3,4.Culex, Anopheles kaj Aedes estas la tri moskitogenroj plej ofte asociitaj kun malsano transdono5.La tropezo de dengue, infekto transdonita de la moskito Aedes aegypti, pliiĝis dum la pasinta jardeko kaj prezentas gravan minacon pri publika sano4,7,8.Laŭ la Monda Organizaĵo pri Sano (OMS), pli ol 40% de la monda loĝantaro estas en risko de dengue, kun 50–100 milionoj da novaj kazoj okazas ĉiujare en pli ol 100 landoj9,10,11.Dengue-febro fariĝis grava publika sano-problemo ĉar ĝia efiko pliiĝis tutmonde12,13,14.Anopheles gambiae, ofte konata kiel la afrika Anopheles moskito, estas la plej grava vektoro de homa malario en tropikaj kaj subtropikaj regionoj15.Okcidenta Nilo-viruso, Sankta Luisa encefalito, japana encefalito, kaj virusaj infektoj de ĉevaloj kaj birdoj estas transdonitaj per Kulex-moskitoj, ofte nomitaj ordinaraj moskitoj.Krome ili estas ankaŭ portantoj de bakteriaj kaj parazitaj malsanoj16.Estas pli ol 3 000 specioj de termitoj en la mondo, kaj ili ekzistas de pli ol 150 milionoj da jaroj17.Plej multaj plagoj vivas en la grundo kaj manĝas ligno kaj lignoproduktoj enhavantaj celulozon.La hinda termito Odontotermes obesus estas grava plago kiu kaŭzas severan damaĝon al gravaj kultivaĵoj kaj plantaj arboj18.En agrikulturaj lokoj, termitinfestiĝoj en diversaj stadioj povas kaŭzi grandegan ekonomian damaĝon al diversaj kultivaĵoj, arbospecioj kaj konstrumaterialoj.Termitoj ankaŭ povas kaŭzi homajn sanproblemojn19.
La temo de rezisto de mikroorganismoj kaj plagoj en la hodiaŭaj farmaciaj kaj agrikulturaj kampoj estas kompleksa20,21.Tial, ambaŭ kompanioj devus serĉi novajn kostefikajn antimikrobajn kaj sekurajn biopesticidojn.Sintezaj insekticidoj nun haveblas kaj pruviĝis infektaj kaj forpuŝas necelajn utilajn insektojn22.En la lastaj jaroj, esplorado pri biosurfaktants disetendiĝis pro ilia apliko en diversaj industrioj.Biosurfactants estas tre utilaj kaj esencaj en agrikulturo, grunda resanigo, nafto-ekstraktado, forigo de bakterioj kaj insektoj, kaj nutraĵprilaborado23,24.Biosurfactants aŭ mikrobaj surfaktants estas biosurfaktant-kemiaĵoj produktitaj de mikroorganismoj kiel bakterioj, gistoj kaj fungoj en marbordaj vivejoj kaj ole-poluitaj areoj25,26.Kemie derivitaj surfaktantoj kaj biosurfaktantoj estas du tipoj kiuj estas akiritaj rekte de la natura medio27.Diversaj biosurfaktantoj estas akiritaj de maraj vivejoj28,29.Sekve, sciencistoj serĉas novajn teknologiojn por la produktado de biosurfactants bazitaj sur naturaj bakterioj30,31.Progresoj en tia esplorado pruvas la gravecon de tiuj biologiaj kunmetaĵoj por mediprotekto32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium kaj ĉi tiuj bakteriaj genroj estas bone studitaj reprezentantoj23,33.
Estas multaj specoj de biosurfactants kun larĝa gamo de aplikoj34.Signifa avantaĝo de ĉi tiuj komponaĵoj estas, ke kelkaj el ili havas kontraŭbakterian, larvicidan kaj insekticidan agadon.Ĉi tio signifas, ke ili povas esti uzataj en la agrikultura, kemia, farmacia kaj kosmetika industrioj35,36,37,38.Ĉar biosurfaktantoj estas ĝenerale biodiserigeblaj kaj ekologie utilaj, ili estas uzataj en integraj damaĝaj programoj por protekti kultivaĵojn39.Tiel, baza scio estis akirita pri la larvicida kaj kontraŭtermita agado de mikrobaj biosurfaktants produktitaj per Enterobacter cloacae SJ2.Ni ekzamenis mortecon kaj histologiajn ŝanĝojn kiam ili estis eksponitaj al malsamaj koncentriĝoj de ramnolipid-biosurfactants.Krome, ni taksis la vaste uzatan komputilan programon Kvanta Strukturo-Agado (QSAR) Ekologia Strukturo-Agado (ECOSAR) por determini akran toksecon por mikroalgoj, dafnioj kaj fiŝoj.
En ĉi tiu studo, la kontraŭtermita aktiveco (tokseco) de purigitaj biosurfaktants ĉe diversaj koncentriĝoj intervalantaj de 30 ĝis 50 mg/ml (je 5 mg/ml intervaloj) estis testita kontraŭ hindaj termitoj, O. obesus kaj kvaraj specioj )Evaluate.Larvoj de enstar Cx.Larvoj de moskitoj quinquefasciatus.Biosurfactant LC50-koncentriĝoj dum 48 horoj kontraŭ O. obesus kaj Cx.C. solanacearum.Moskitolarvoj estis identigitaj per nelinia regresa kurba konvena metodo.La rezultoj montris ke termitmorteco pliiĝis kun kreskanta biosurfaktantkoncentriĝo.La rezultoj montris, ke la biosurfaktant havis larvicidan aktivecon (Figuro 1) kaj kontraŭ-termitan aktivecon (Figuro 2), kun 48-horaj LC50-valoroj (95% CI) de 26,49 mg/L (25,40 ĝis 27,57) kaj 33,43 mg/ l (Fig. 31.09 ĝis 35.68), respektive (Tabelo 1).Laŭ akuta tokseco (48 horoj), la biosurfaktant estas klasifikita kiel "damaĝa" al la testitaj organismoj.La biosurfaktant produktita en ĉi tiu studo montris bonegan larvicidan aktivecon kun 100% morteco ene de 24-48 horoj de ekspozicio.
Kalkulu la LC50-valoron por larvicida agado.Nelinia regresa kurbo konveno (solidlinio) kaj 95% konfidenca intervalo (ombrita areo) por relativa morteco (%).
Kalkulu la LC50-valoron por kontraŭ-termita agado.Nelinia regresa kurbo konveno (solidlinio) kaj 95% konfidenca intervalo (ombrita areo) por relativa morteco (%).
Ĉe la fino de la eksperimento, morfologiaj ŝanĝoj kaj anomalioj estis observitaj sub la mikroskopo.Morfologiaj ŝanĝoj estis observitaj en la kontrolo kaj traktitaj grupoj ĉe 40x pligrandigo.Kiel montrite en Figuro 3, kreskodifekto okazis en la plimulto de larvoj traktitaj kun biosurfaktants.Figuro 3a montras normalan Cx.quinquefasciatus, Figuro 3b montras anomalian Cx.Kaŭzas kvin nematodlarvojn.
Efiko de submortigaj (LC50) dozoj de biosurfaktants sur la evoluo de Culex quinquefasciatus larvoj.Lummikroskopiobildo (a) de normala Cx ĉe 40× pligrandigo.quinquefasciatus (b) Nenormala Cx.Kaŭzas kvin nematodlarvojn.
En la nuna studo, histologia ekzameno de traktitaj larvoj (Fig. 4) kaj termitoj (Fig. 5) malkaŝis plurajn anomaliojn, inkluzive de redukto de abdomena areo kaj damaĝo al muskoloj, epiteliaj tavoloj kaj haŭto.midgut.Histologio rivelis la mekanismon de inhibicia agado de la biosurfaktant uzita en ĉi tiu studo.
Histopatologio de normalaj netraktitaj 4-a enstar Cx-larvoj.quinquefasciatus larvoj (kontrolo: (a,b)) kaj traktitaj kun biosurfaktant (traktado: (c,d)).Sagoj indikas traktitan intestan epitelion (epi), nukleojn (n), kaj muskolon (mu).Trinkejo = 50 µm.
Histopatologio de normala netraktita O. obesus (kontrolo: (a,b)) kaj biosurfaktant traktita (traktado: (c,d)).Sagoj indikas intestan epitelion (epi) kaj muskolon (mu), respektive.Trinkejo = 50 µm.
En ĉi tiu studo, ECOSAR kutimis antaŭdiri la akutan toksecon de ramnolipid-biosurfaktantproduktoj al primaraj produktantoj (verdaj algoj), primaraj konsumantoj (akvaj puloj) kaj sekundaraj konsumantoj (fiŝoj).Ĉi tiu programo uzas altnivelajn kvantajn struktur-aktivecajn kunmetitajn modelojn por taksi toksecon bazitan sur molekula strukturo.La modelo uzas struktur-aktivecon (SAR) softvaron por kalkuli la akutan kaj longperspektivan toksecon de substancoj al akvaj specioj.Specife, Tabelo 2 resumas la laŭtaksajn averaĝajn mortigajn koncentriĝojn (LC50) kaj averaĝajn efikajn koncentriĝojn (EC50) por pluraj specioj.Suspektata tokseco estis kategoriigita en kvar nivelojn uzante la Tutmonde Harmonizitan Sistemon de Klasifiko kaj Etikedado de Kemiaĵoj (Tabelo 3).
Kontrolo de vektor-portitaj malsanoj, precipe trostreĉoj de moskitoj kaj Aedes-moskitoj.Egiptanoj, nun malfacila laboro 40,41,42,43,44,45,46.Kvankam kelkaj kemie haveblaj insekticidoj, kiel ekzemple piretroidoj kaj organofosfatoj, estas iom utilaj, ili prezentas signifajn riskojn al homa sano, inkluzive de diabeto, generaj malsanoj, neŭrologiaj malsanoj, kancero kaj spiraj malsanoj.Krome, kun la tempo, ĉi tiuj insektoj povas fariĝi imunaj al ili13,43,48.Tiel, efikaj kaj ekologiemaj biologiaj kontrolaj mezuroj fariĝos pli populara metodo de moskitokontrolo49,50.Benelli51 sugestis ke frua kontrolo de moskitovektoroj estus pli efika en urbaj areoj, sed ili ne rekomendis la uzon de larvicidoj en kamparaj lokoj52.Tom et al 53 ankaŭ sugestis, ke kontroli moskitojn en iliaj nematuraj stadioj estus sekura kaj simpla strategio ĉar ili estas pli sentemaj al kontrolagentoj 54 .
Biosurfaktantproduktado de potenca trostreĉiĝo (Enterobacter cloacae SJ2) montris konsekvencan kaj promesplenan efikecon.Nia antaŭa studo raportis, ke Enterobacter cloacae SJ2 optimumigas produktadon de biosurfaktant uzante fizikkemiajn parametrojn26.Laŭ ilia studo, la optimumaj kondiĉoj por biosurfaktantproduktado per ebla E. cloacae izolita estis kovado dum 36 horoj, agitado je 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, saleco 1 ppt, 2% glukozo kiel karbonfonto, 1% gisto. .la ekstrakto estis uzata kiel nitrogena fonto por akiri 2,61 g/L biosurfactant.Krome, la biosurfactants estis karakterizitaj uzante TLC, FTIR kaj MALDI-TOF-MS.Tio konfirmis ke ramnolipido estas biosurfaktant.Glikolipidaj biosurfaktants estas la plej intense studita klaso de aliaj specoj de biosurfaktants55.Ili konsistas el karbonhidrataj kaj lipidaj partoj, ĉefe grasacidaj ĉenoj.Inter glikolipidoj, la ĉefaj reprezentantoj estas ramnolipid kaj soforolipid56.Ramnolipidoj enhavas du ramnozajn partojn ligitajn al mono- aŭ di-β-hidroksiddekanona acido 57 .La uzo de ramnolipidoj en la medicinaj kaj farmaciaj industrioj estas bone establita 58 , krom ilia lastatempa uzo kiel pesticidoj 59 .
La interagado de la biosurfaktant kun la hidrofoba regiono de la spira sifono permesas al akvo pasi tra ĝia stomakavaĵo, tiel pliigante la kontakton de la larvoj kun la akva medio.La ĉeesto de biosurfactants ankaŭ influas la trakeon, kies longeco estas proksima al la surfaco, kio faciligas al la larvoj rampi al la surfaco kaj spiri.Kiel rezulto, la surfaca tensio de akvo malpliiĝas.Ĉar la larvoj ne povas alkroĉigi al la surfaco de la akvo, ili falas al la fundo de la tanko, interrompante hidrostatikan premon, rezultigante troan energi-elspezon kaj morton per dronado38,60.Similaj rezultoj estis akiritaj de Ghribi61, kie biosurfaktant produktita fare de Bacillus subtilis elmontris larvicidan agadon kontraŭ Ephestia kuehniella.Simile, la larvicida agado de Cx.Das kaj Mukherjee23 ankaŭ taksis la efikon de ciklaj lipopeptidoj sur quinquefasciatus larvoj.
La rezultoj de ĉi tiu studo koncernas la larvicidan agadon de ramnolipid-biosurfaktants kontraŭ Cx.Mortigo de quinquefasciatus moskitoj kongruas kun antaŭe publikigitaj rezultoj.Ekzemple, surfactin-bazitaj biosurfaktants produktitaj per diversaj bakterioj de la genro Bacillus estas uzitaj.kaj Pseudomonas spp.Kelkaj fruaj raportoj64,65,66 raportis larvomortigan agadon de lipopeptidaj biosurfaktantoj de Bacillus subtilis23.Deepali et al.63 trovis ke ramnolipida biosurfaktant izolita de Stenotropomonas maltophilia havis potencan larvicidan agadon ĉe koncentriĝo de 10 mg/L.Silva et al.67 raportis la larvicidan aktivecon de ramnolipida biosurfaktanto kontraŭ Ae ĉe koncentriĝo de 1 g/L.Aedes aegypti.Kanakdande et al.68 raportis ke lipopeptidaj biosurfaktants produktitaj per Bacillus subtilis kaŭzis totalan mortecon en Culex-larvoj kaj termitoj kun la lipofila frakcio de Eŭkalipto.Simile, Masendra et al.69 raportita laborista formiko (Cryptotermes cynocephalus Light.) Morteco de 61,7% en la lipofilaj n -hexano kaj EtOAc frakcioj de E. kruda ekstrakto.
Parthipan et al 70 raportis la insekticidan uzon de lipopeptidaj biosurfactants produktitaj de Bacillus subtilis A1 kaj Pseudomonas stutzeri NA3 kontraŭ Anopheles Stephensi, vektoro de la malaria parazito Plasmodium.Ili observis ke larvoj kaj krizalidoj pluvivis pli longe, havis pli mallongajn ovopoziciajn periodojn, estis sterilaj, kaj havis pli mallongajn vivdaŭrojn kiam traktitaj kun malsamaj koncentriĝoj de biosurfaktants.La observitaj LC50-valoroj de B. subtilis biosurfactant A1 estis 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 kaj 7.99 mg/L por malsamaj larvaj statoj (t.e. larvoj I, II, III, IV kaj etapo pupoj) respektive.En komparo, biosurfaktants por larvaj stadioj I-IV kaj pupaj stadioj de Pseudomonas stutzeri NA3 estis 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 kaj 6.99 mg/L, respektive.La malfrua fenologio de pluvivaj larvoj kaj krizalidoj supozeble estas la rezulto de signifaj fiziologiaj kaj metabolaj tumultoj kaŭzitaj de insekticidaj traktadoj71.
Wickerhamomyces anomalus-trostreĉiĝo CCMA 0358 produktas biosurfaktant kun 100% larvicida agado kontraŭ Aedes-moskitoj.aegypti 24-hora intervalo 38 estis pli alta ol raportita de Silva et al.Biosurfaktanto produktita de Pseudomonas aeruginosa uzante sunfloran oleon kiel karbonfonton pruviĝis mortigi 100% de larvoj ene de 48 horoj 67 .Abinaya et al.72 kaj Pradhan et al.73 ankaŭ pruvis la larvicidajn aŭ insekticidajn efikojn de surfaktantoj produktitaj de pluraj izolitaĵoj de la genro Bacillus.Antaŭe publikigita studo de Senthil-Nathan et al.trovis ke 100% de moskitolarvoj eksponitaj al plantaj lagunoj verŝajne mortos.74.
Taksi la submortigajn efikojn de insekticidoj sur insektbiologio estas kritika por integraj plagotraktadprogramoj ĉar submortigaj dozoj/koncentriĝoj ne mortigas insektojn sed povas redukti insektajn populaciojn en estontaj generacioj interrompante biologiajn karakterizaĵojn10.Siqueira et al 75 observis kompletan larvicidan aktivecon (100% morteco) de ramnolipida biosurfactant (300 mg/ml) kiam provite ĉe diversaj koncentriĝoj intervalantaj de 50 ĝis 300 mg/ml.Larva stadio de Aedes aegypti trostreĉoj.Ili analizis la efikojn de tempo al morto kaj submortigaj koncentriĝoj sur larva supervivo kaj naĝagado.Krome, ili observis malpliiĝon de naĝanta rapideco post 24-48 horoj da ekspozicio al submortigaj koncentriĝoj de biosurfaktant (ekz., 50 mg/mL kaj 100 mg/mL).Venenoj kiuj havas esperigajn submortigajn rolojn supozeble estas pli efikaj en kaŭzado de multobla damaĝo al senŝirmaj plagoj76.
Histologiaj observoj de niaj rezultoj indikas ke biosurfactants produktitaj de Enterobacter cloacae SJ2 signife ŝanĝas la histojn de moskito (Cx. quinquefasciatus) kaj termito (O. obesus) larvoj.Similaj anomalioj estis kaŭzitaj de preparoj de bazila oleo en An.gambiaes.s kaj An.arabica estis priskribitaj de Ochola77.Kamaraj et al.78 ankaŭ priskribis la samajn morfologiajn anomaliojn en An.La larvoj de Stephanie estis eksponitaj al oraj nanopartikloj.Vasantha-Srinivasan et al.79 ankaŭ raportis ke la esenca oleo de paŝtista monujo grave difektis la ĉambron kaj epiteliajn tavolojn de Aedes albopictus.Aedes aegypti.Raghavendran et al raportis ke moskitolarvoj estis traktitaj kun 500 mg/ml micela ekstrakto de loka Penicillium-fungo.Ae montras severan histologian difekton.aegypti kaj Cx.Mortprocento 80. Antaŭe, Abinaya et al.Larvoj de kvara etapo de An estis studitaj.Stephensi kaj Ae.aegypti trovis multajn histologiajn ŝanĝojn en Aedes aegypti traktita kun B. licheniformis eksopolisakaridoj, inkluzive de stomaka cekumo, muskola atrofio, damaĝo kaj malorganizado de nervkorda ganglioj72.Laŭ Raghavendran et al., post traktado kun P. daleae micelia ekstrakto, la mezgutaj ĉeloj de testitaj moskitoj (4-a enstarlarvoj) montris ŝveliĝon de la intesta lumeno, malkreskon en interĉela enhavo, kaj nuklea degenero81.La samaj histologiaj ŝanĝoj estis observitaj ĉe moskitolarvoj traktitaj kun eĥinacea foliekstraktaĵo, indikante la insekticidan potencialon de la traktitaj kunmetaĵoj50.
La uzo de ECOSAR-programaro ricevis internacian rekonon82.Nuna esplorado sugestas, ke la akuta tokseco de ECOSAR-biosurfaktants al mikroalgoj (C. vulgaris), fiŝoj kaj akvaj puloj (D. magna) falas ene de la "tokseco" kategorio difinita de Unuiĝintaj Nacioj83.La modelo de ekotokseco de ECOSAR uzas SAR kaj QSAR por antaŭdiri akutan kaj longdaŭran toksecon de substancoj kaj ofte estas uzata por antaŭdiri la toksecon de organikaj malpurigaĵoj82,84.
Paraformaldehido, natria fosfata bufro (pH 7.4) kaj ĉiuj aliaj kemiaĵoj uzataj en ĉi tiu studo estis aĉetitaj de HiMedia Laboratories, Barato.
Biosurfactant-produktado estis farita en 500 mL Erlenmeyer-flakonoj enhavantaj 200 mL da sterila Bushnell Haas-medio kompletigita kun 1% nafto kiel la sola karbofonto.Antaŭkulturo de Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) estis inokulita kaj kulturita sur enorbita skuilo je 37 °C, 200 rpm dum 7 tagoj.Post la inkubacio, la biosurfaktant estis ĉerpita centrifugante la kulturmedion je 3400 × g dum 20 minutoj je 4 °C kaj la rezulta supernatante estis uzata por ekzamenaj celoj.La optimumigaj proceduroj kaj karakterizado de biosurfactants estis adoptitaj de nia pli frua studo26.
Culex quinquefasciatus larvoj estis akiritaj de la Centro por Altnivela Studo en Marbiologio (CAS), Palanchipetai, Tamilnado (Hindio).Larvoj estis breditaj en plastaj ujoj plenigitaj kun dejonigita akvo je 27 ± 2 °C kaj fotoperiodo de 12:12 (lumo:mallumo).Larvoj de moskito estis nutritaj kun 10% glukoza solvaĵo.
Larvoj de Culex quinquefasciatus estis trovitaj en malfermaj kaj neprotektitaj sep fosoj.Uzu normajn klasifikajn gvidliniojn por identigi kaj kulturi larvojn en la laboratorio85.Larvicidaj provoj estis faritaj laŭ la rekomendoj de la Monda Organizo pri Sano 86 .SH.Larvoj de kvara instar de quinquefasciatus estis kolektitaj en fermitaj tuboj en grupoj de 25 ml kaj 50 ml kun aerinterspaco de du trionoj de sia kapacito.Biosurfactant (0-50 mg/ml) estis aldonita al ĉiu tubo individue kaj stokita je 25 °C.La kontroltubo uzis nur distilitan akvon (50 ml).Mortaj larvoj estis konsiderataj kiel tiuj, kiuj ne montris signojn de naĝado dum la kovado (12–48 horoj) 87 .Kalkulu la procenton de larva morteco uzante la ekvacion.(1)88.
La familio Odontotermitidae inkludas la hindan termiton Odontotermes obesus, trovitan en putriĝantaj tagaloj ĉe la Agrikultura Kampuso (Annamalai University, Hindio).Testu ĉi tiun biosurfaktant (0-50 mg/ml) uzante normalajn procedurojn por determini ĉu ĝi estas damaĝa.Post sekiĝo en lamena aerfluo dum 30 minutoj, ĉiu strio de Whatman-papero estis kovrita per biosurfaktant ĉe koncentriĝo de 30, 40 aŭ 50 mg/ml.Antaŭtegitaj kaj netegitaj paperstrioj estis testitaj kaj komparitaj en la centro de Petri-plado.Ĉiu petri plado enhavas ĉirkaŭ tridek aktivajn termitojn O. obesus.Kontrolaj kaj testaj termitoj ricevis malsekan paperon kiel nutraĵfonto.Ĉiuj teleroj estis konservitaj ĉe ĉambra temperaturo dum la inkubacio.Termitoj mortis post 12, 24, 36 kaj 48 horoj89,90.Ekvacio 1 tiam estis uzita por taksi la procenton de termitmorteco ĉe malsamaj biosurfaktantkoncentriĝoj.(2).
La specimenoj estis konservitaj sur glacio kaj pakitaj en mikrotuboj enhavantaj 100 ml da 0.1 M natria fosfata bufro (pH 7.4) kaj senditaj al la Central Aquaculture Pathology Laboratory (CAPL) de la Rajiv Gandhi Center for Aquaculture (RGCA).Laboratorio de Histologio, Sirkali, Mayiladuthurai.Distrikto, Tamilnado, Hindio por plia analizo.Specimenoj tuj estis fiksitaj en 4% paraformaldehido je 37 °C dum 48 horoj.
Post la fiksa fazo, la materialo estis lavita trifoje per 0,1 M natria fosfata bufro (pH 7,4), laŭpaŝe malhidratigita en etanolo kaj trempita en LEICA-rezino dum 7 tagoj.La substanco tiam estas metita en plastan muldilon plenigitan per rezino kaj polimerigilo, kaj poste metita en fornon varmigitan ĝis 37 °C ĝis la bloko enhavanta la substancon estas tute polimerigita.
Post polimerigo, la blokoj estis tranĉitaj per mikrotomo LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, Usono) al dikeco de 3 mm.La sekcioj estas grupigitaj sur diapozitivoj, kun ses sekcioj per diapozitivo.La diapozitivoj estis sekigitaj ĉe ĉambra temperaturo, tiam makulitaj per hematoksilino dum 7 minutoj kaj lavitaj per flua akvo dum 4 minutoj.Krome, apliku la eosinan solvon sur la haŭton dum 5 minutoj kaj lavu per kuranta akvo dum 5 minutoj.
Akuta tokseco estis antaŭdirita uzante akvajn organismojn de malsamaj tropikaj niveloj: 96-hora fiŝo LC50, 48-hora D. magna LC50, kaj 96-hora verda algo EC50.La tokseco de ramnolipid-biosurfaktants al fiŝoj kaj verdaj algoj estis taksita uzante ECOSAR softvarversion 2.2 por Vindozo evoluigita fare de la Usona Mediprotekta Agentejo.(Havebla interrete ĉe https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Ĉiuj provoj pri larvicida kaj kontraŭtermita agado estis faritaj triope.Nelinia regreso (protokolo de dozaj respondvariabloj) de larvaj kaj termitaj mortecdatenoj estis farita por kalkuli mezan mortigan koncentriĝon (LC50) kun 95% konfidenca intervalo, kaj koncentriĝaj respondkurboj estis generitaj uzante Prism® (versio 8.0, GraphPad Software) Inc. , Usono) 84, 91.
La nuna studo rivelas la potencialon de mikrobaj biosurfactants produktitaj de Enterobacter cloacae SJ2 kiel moskitaj larvicidaj kaj kontraŭtermitaj agentoj, kaj ĉi tiu laboro kontribuos al pli bona kompreno de la mekanismoj de larvicida kaj kontraŭtermita agado.Histologiaj studoj de larvoj traktitaj kun biosurfaktants montris damaĝon al la digesta vojo, mezintesto, cerba kortekso kaj hiperplazio de intestaj epiteliĉeloj.Rezultoj: Toksologia taksado de la antitermito kaj larvicida agado de ramnolipida biosurfaktanto produktita de Enterobacter cloacae SJ2 rivelis ke tiu izolitaĵo estas ebla biopesticido por la kontrolo de vektor-portitaj malsanoj de moskitoj (Cx quinquefasciatus) kaj termitoj (O. obesus).Estas bezono kompreni la subesta media tokseco de biosurfaktants kaj iliaj eblaj mediaj efikoj.Ĉi tiu studo disponigas sciencan bazon por taksi la median riskon de biosurfaktants.
    


Afiŝtempo: Apr-09-2024